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食品微生物采样检测箱
使用说明 一、适用范围 适用于食物中毒样品中致病菌的快速筛查，常规样品中卫生指标菌与致病菌的日常监测以及检测样品的采集。 二、工作意义 食品在生产、加工、储存、运输和销售等各个环节都有可能受到有害微生物的污染，从而引起食品腐败变质和食源性食物中毒的发生，而且一些危险的致病菌不断涌现出来。据世界卫生组织估计，在全世界每年数以亿计的食源性疾病患者中，70％是由于食用了各种致病性微生物污染的食品和饮水造成的。中国社科院发布的首部食品安全绿皮书《中国食品安全报告（2007）》指出，当前我国食品安全的形式依然严峻，其中微生物污染和化学性食物中毒是影响我国食品安全的最主要因素。微生物污染包括细菌性污染、病毒和真菌及其毒素的污染。2000年至2002年，中国疾病预防控制中心营养与食品安全所对全国部分省市的生肉、熟肉、乳和乳制品、水产品、蔬菜中的致病菌污染状况的监测结果表明，微生物性食物中毒仍居首位，占39.62％；化学性食物中毒占38.56％；动植物性和原因不明的食物中毒均占10％左右。 为了减少和防止由微生物污染事件的发生，对食品采用有效的检验方法进行检测和监督是非常必要的。利用传统的检测方法，主要包括形态检查和生化方法，其准确性和灵敏性均较高，但涉及的实验较多、操作繁琐、需要时间较长、准备和收尾工作繁重。有条件的实验室采用了PCR仪、全自动细菌鉴定仪、全自动荧光酶标免疫测试系统等先进设备进行检验，具有快速、灵敏、准确的优点，但这些先进设备价值昂贵，基层检测监管单位和食品生产企业一般难以配备。 1955年德国学者F.J.Forg 发明了一种简单快速的大肠菌群快速检测法—纸片法，使原来的检测周期由72小时缩短到15小时，材料成本降低了四分之三，同时大大简化了操作程序。从此，这种集化学、高分子学和微生物学于一体的检测方法开始发展起来，近十几年来发展更为快速。 纸片法或测试片法是基于微生物具有复杂多样的酶系统，通过加入特异性酶的底物，在酶的作用下游离出发色基团，直接观察菌落颜色即可对菌类做出鉴定。从而使传统方法需要几步不同反应、几天甚至更长时间才能完成的检测过程简化为一步完成，检测时间缩短到24小时以内，不但能够大大提高检测工作的效率，还可减少大量人工成本。目前国外已有一些知名品牌，国内一些企业出品的此类产品其质量也是越来越好，为此项工作的开展与普及奠定了基础。 另外，在国标检测方法基础上研发出的大肠菌检测试剂盒以及致病菌增菌检测试剂盒，采用包被技术将干燥培养基包被在试剂盒中，随时取用，也大大简化了实验前的准备工作。而且，大肠菌检测试剂盒秉承了国标方法中大肠菌阳性结果时的产酸产气的观察理念，保证了检测结果的准确性。至于致病菌增菌检测试剂盒，除日常卫生指标的控制外，更加有利于食物中毒因子的筛选和卫生保障应急处理时使用。 1 开展微生物快速检测所需的基本条件 1.1 一间通风良好、面积不需要很大的独立房间，房间里最好备有紫外线消毒灯，洗手盆，实验台。应急检测时，临时性的房间应注意工作环境的的消毒（如采用84消毒液消毒等），并备好酒精灯。 1.2 一台高压锅或红外线消毒柜（家用消毒碗柜也可，用于消毒取样罐、均质杯、吸管、培养皿和其他取样工具，在消毒柜内放一小杯水可使消毒效果更有保证，注意消毒物品不要接触到红外发热管）；应急检测时，应备好消毒液和酒精，含氯消毒液的浓度在200ppm时，器皿消毒应保持5分钟以上。 1.3 一台小型恒温培养箱； 1.4 有条件时，配备一台普通冰箱，用于存放样品； 1.5 食品微生物采样检测箱，箱内备有采样用具与实验用的一些工具和器皿； 1.6 检测用试纸与试剂盒。 2 样品稀释液的配制与移液器的消毒 2.1 生理盐水的配置与灭菌：取 2.2 移液器管头的消毒：将管头放入锡箔袋或用锡箔纸包好，放入民用红外线消毒柜中消毒；或将管头放入消毒液中浸泡，取用时注意甩干消毒液并用无菌生理盐水冲洗三次。 2.3 消毒效果观察：用移液器取1ml配制好的生理盐水加入到菌落总数检测纸片上，放入培养箱，恒温 3. 无菌操作和注意事项 3.1点燃酒精灯，营造局部无菌环境。取样和加样时尽量靠近酒精灯操作。能用火焰消毒的操作工具如镊子、剪子、长柄勺、小刀等尽量在酒精灯上消毒后使用。 3.2 用75%酒精棉球将手和样品开口处周围抹擦消毒。 3.3 将无菌袋或无菌器皿放在天平上，称量 3.4若不能及时检验,应将冷冻样品置于 3.5检测用纸片或测试片一般应放在4～ 3.6 检测用纸片或测试片接种时，为防止菌落聚集在一起不方便计数，最好缓慢均匀地将样品匀液加到加样区的各个部分。加完液稍等片刻，待液体渗透差不多时再将上盖膜轻轻盖下，以免液体外溢造成结果误差。 3.7 检测用纸片或测试片培养时，一定要将测试片放回原来的自封袋中，将袋口密封好再放入培养箱中，否则水分蒸发使滤纸变得很干燥，影响菌落的生长。 3.8大肠菌检测试剂盒培养前，注意排气泡。从培养箱中取出时注意平拿平放，防止集气孔中反应产生的气泡溢出。 3.9致病菌出现阳性样本时，需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理 。 1. 食物中毒样品的快速筛查
2. 卫生指示菌与致病菌的日常监测
3. 具体操作详见产品说明书 |
